Identifisering
Ved identifisering av bakterier fra urin kan man vurdere oppvekst på agarer. Man bruker flere metoder for å vurdere oppveksten. Man kan observere utseende, lukt, hemolyse og tolke biokjemiske- og immunologiske tester. Gramfarging er en metode for å bestemme gram-egenskapene til bakterien. Ved bioingeniørstudiet benyttes ofte flytskjema som et hjelpemiddel til å bestemme hvilke bakterier en har. Flytskjemaer er skjema som viser hvilke observasjoner som skal til for å utelukke bakterietyper og for å identifisere bakterien. Flytskjemaer baserer seg på biokjemiske tester og immunologiske tester samt visuelle vurderinger av oppveksten.
Flytskjema for bakteriebestemmelse basert på hvilke biokjemiske tester som utføres og resultater av disse testene. Bakteriene E. coli, Mirabilis og hvite stafylokokker er markert med gult.
Biokjemiske tester
Bakterier har ulike biokjemiske egenskaper som kan benyttes for å identifisering. Biokjemiske tester gir en presis og mer konkret indikasjon på hvilke bakterier man har oppvekst av, enn det man kan se med det blotte øyet slik som størrelse, farge på kolonier, kolonienes konsistens, og mengde oppvekst.
Oxidase-test
Oxidase-testen er basert på produksjon av enzymet aminophenol oxidase som finnes i noen bakteriers elektrontransportkjede. Enzymet oksiderer redoks-farge som er tilstede i reagenset slik at det skjer en fargeforandring til mørk blå. Oksidase benyttes for identifisering av gram negative bakterier. (1)
Katalase-test
Katalase-testen brukes for å påvise enzymet katalase. Enzymet spalter H2O2 (hydrogenperoksid), et giftig stoffskifteprodukt, til vann og oksygen. Når bakterier vokser aerobt, produseres H2O2 som etterhvert vil akkumuleres og medføre celledød. Mikroorganismer må derfor kunne bryte ned denne forbindelsen ved hjelp av katalase-enzymet. Positiv reaksjon vil ses på som brusing, dette kommer av gassdannelsen (O2). Stafylokokker er katalase positive, men noen enterokokker samt røde og hvite blodceller kan gi svak brusing. (1)
Katalasetest brukes for å skille staffylokokker og streptokokker. Staffylokokker er katalase positive, mens streptokokker er katalase negative.
Pastorex Staph Plus
Pastorex Staph Plus bruker latex-partikler dekket av IgG, fibrinogen og spesifikt antistoff for å identifisere gule stafylokokker. Antigenet på latex-partiklene er spesifikt for kapslene på gule stafylokokker, mens IgG vil bindes til protein A og fibrinogen til clumping faktor som er i stafylokokkenes cellevegg. Dersom det oppstår agglutinasjon ved bruk av Pastorex Staph Plus, har man biokjemisk påvist tilstedeværelse av gule stafylokokker. (1)
Kilder:
- Kvam, Augusta Irene, Slotterøy, Kirsten Lines, Kristiansen, Kine Husteli. Metodehefte Medisinsk mikrobiologi 2021/2022. NTNU Institutt for bioingeniørfag.