Perls prussian blå metode er en spesialfargemetode som påviser endogene pigmenter som jern og eksogene pigmenter som asbest, i for eksempel lungevev. I lunge er det også vanlig å finne karbonpigmenter, spesielt hos røykere. Perls kan benyttes på blant annet lungevev ved mistanke om patologisk blødning (1). Ødelagte erytrocytter vil tas opp og brytes ned av makrofager til aminosyrer, bilirubin og jern (2).
Fargemetoden er en substitusjonsmetode, der anionet substitueres. Anionene i vevet er proteiner og anionene i løsningen er [Fe(CN)6]4-.
Reaksjonsligningen viser anionsubstitusjon for jern med Perls prussian blå metode:
(Fe3+ – Anionvev) + H+[Fe(CN)6]4- → (Fe3+ – [Fe(CN)6]4-) + Anion–
Når jern kommer i kontakt med ferrocyanid vil det dissosieres fra vevet. Videre reagerer dette med reagenset ferrocyanid og danner et tungtløselig, blått produkt (3). Reagenset kontrolleres med en positiv kontroll. Her kan for eksempel leversnitt med kjent hemokromatose benyttes. I Perls prussian blå metode benyttes kjernerød til å farge kjerner (4).
Ved å farge med Perls vil komponenter som inneholder jern farges blålig, mens resterende bakgrunn farges rosa/rød (4).
Lungesnitt og leversnitt farget med Perls, 100x forstørrelse
Det øverste bilde viser lungesnitt farget med Perls. Det nederste bilde viser positiv kontroll av et leversnitt med kjent hemokromatose. Lær mer om hvordan lungesnitt farget med Perls ser ut her.
Referanser
1: Cook DJ, Warren PJ. Cellular pathology, an introduction to techniques and applications. 3.utgave. Bloxham, United Kingdom: Scion Publishing Ltd; 2015.
2: Sand O, Sjaastad ØV, Haug E, Bjålie JG. Menneskekroppen, Fysiologi og anatomi. 3.utgave. St. Olavs plass, Oslo: Gyldendal Akademisk; 2018.
3: A. P. Andersen, E. Hasselager, P. E. Høyer, M. Møller, P. Prentø, B. van Deurs. Theory and Strategy in Histochemistry. 1. utgave. Copenhagen, Denmark: DRS Forlag; 1997.
4: Bancroft, John D., Gamble, Marilyn. Theory and Practice of Histological Techniques. 6. utgave. Elsevier, Churchill Livingstone; 2008.